SIEX - Sistema de Informações de Extensão

Plano de ensino: Curso de Extensão: Curso teórico/prático sobre tecnologias de edição gênica baseadas em CRISPR; Carga horária total: 40 horas; Modalidade: Presencial; Público-alvo: Estudantes de graduação e pós-graduação em Ciências Biológicas, Biotecnologia, Biomedicina, Farmácia, Medicina, Veterinária e áreas afins. Profissionais da área da saúde e docentes.

Objetivos e Resultados Esperados: Introduzir conceitos teóricos e práticos sobre tecnologias de edição gênica baseadas em CRISPR e suas principais aplicações.

Justificativas: A tecnologia CRISPR de edição gênica tem revolucionado a biologia e a medicina, apresentando aplicações acadêmicas e terapêuticas. Sua aplicação, entretanto, requer conhecimento avançado e específico que será explorado no curso.

Metodologias: Aulas teóricas e práticas em laboratórios de pesquisa, realizando experimentos em culturas de células para a compreensão da técnica CRISPR e aplicações derivadas.

Conteúdo programático com responsáveis pedagógicos por tema/assunto - aula ou grupo de aulas: 1) Descoberta do sistema CRISPR/Cas9 em procariotos. 2) Desenvolvimento do sistema CRISPR/Cas9 e tecnologias derivadas como Base-editing e Prime-editing para células eucariotas. 3) Apresentação de ferramentas para desenho de sgRNAs e teste da eficiência do sistema CRISPR/Cas9. 4) Aplicações da tecnologia para modelos celulares in vitro. 5) Aplicação e comparação entre as tecnologias Cre-loxp e CRISPR/Cas9 para a geração de animais transgênicos. 6) Desenho passo-a-passo de sgRNA e primers para o sistema CRISPR e uso de programas de bioinformática. 7) Ensaios de cultivo celular para edição gênica 8) Aplicações do teste da T7 endonuclease I. 9) Isolamento e genotipagem por PCR e sequenciamento de clones celulares. 10) Teste in vitro da atividade da Cas9.

Referências (bibliográficas e outras): Hsu PD, Lander ES, Zhang F. Development and applications of CRISPR-Cas9 for genome engineering. Cell 2014;157:1262¿78. doi:10.1016/j.cell.2014.05.010. Ma H, Marti-Gutierrez N, Park S-W, Wu J, Lee Y, Suzuki K, et al. Correction of a pathogenic gene mutation in human embryos. Nature 2017. doi:10.1038/nature23305. Mali P, Esvelt KM, Church GM. Cas9 as a versatile tool for engineering biology. Nat Methods 2013;10:957¿63. doi:10.1038/nmeth.2649. Pavan ICB, Yokoo S, Granato DC, Meneguello L, Carnielli CM, Tavares MR, et al. Different interactomes for p70-S6K1 and p54-S6K2 revealed by proteomic analysis. Proteomics 2016;16:2650¿66. doi:10.1002/pmic.201500249. Ran F, Hsu P, Wright J, Agarwala V. Genome engineering using the CRISPR-Cas9 system. Nat Protoc 2013;8:2281¿308. doi:10.1038/nprot.2013.143. Rosenberg SA, Restifo NP. Adoptive cell transfer as personalized immunotherapy for human cancer. Science 2015;348:62¿8. doi:10.1126/science.aaa4967. Wang F, Qi LS. Applications of CRISPR Genome Engineering in Cell Biology. Trends Cell Biol 2016;26:875¿88. doi:10.1016/j.tcb.2016.08.004. Yoshiga D, Sato N, Torisu T, Mori H, Yoshida R, Nakamura S, et al. Adaptor protein SH2-B linking receptor-tyrosine kinase and Akt promotes adipocyte differentiation by regulating peroxisome proliferator-activated receptor gamma messenger ribonucleic acid levels. Mol Endocrinol 2007;21:1120¿31. doi:10.1210/me.2006-0413.

Modo e critérios da avaliação de aproveitamento: Apresentação de seminários e dados obtidos dos experimentos propostos no curso permitirão avaliar o aprendizado dos alunos

Estratégias de Divulgação: Redes sociais, listas de email, sites de programas de pós-graduação e laboratórios e da própria universidade e PROEC

Recursos didáticos: Suporte audiovisual e de mobiliários da UNIFESP para eventuais palestras a distância. O curso será realizado presencialmente nos laboratórios de pesquisa e anfiteatro do INFAR da UNIFESP.

Ementa: Conceitos e fundamentos teóricos de tecnologias de edição gênica. Aplicações tecnológicas e terapêuticas da técnica CRISPR. Avanços recentes e o estado da arte da tecnologia CRISPR. Perspectivas da tecnologia CRISPR. Tecnologia derivadas da tecnologia CRISPR. como Base editing e Prime editing. Aulas práticas sobre a tecnologia CRISPR.